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巨噬细胞Tim-3和Galectin-9在人慢性根尖周病组织中

作者2019-04-17 10:24未知
背景和目的:慢性根尖周病(chronic periapical diseases)是一种多数继发于根管长期的牙髓组织感染,慢性长期的持续抗原刺激引起宿主免疫反应,临床表现为根尖周牙槽骨组织吸收破坏的牙体牙髓疾病。目前认为,根尖周疾病主要与牙髓卟啉单胞菌(Porphyromonas endodontalis,P.e)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)、中间普氏菌(Prevotella intermedia,P.i)等革兰氏阳性菌(G+)和阴性菌(G-)的多重混合感染相关。由根尖周组织中大量的免疫活性细胞及其分泌的各种细胞因子(cytokines,CKs),通过复杂的交互作用,最终激活破骨细胞,导致根尖周牙槽骨和牙骨质的吸收破坏。巨噬细胞(macrophages,Mφ)在固有免疫和适应性免疫反应中起着关键性的作用,当宿主受到病原体感染后,Mφ在炎症过程中能有效清除病原体。Mφ是根尖周病中的重要免疫活性细胞,在慢性根尖周炎的免疫应答、病损发展及长期炎症性等方面起关键作用。研究表明,不同疾病的发展进程、组织内环境以及细胞因子的变化等可诱导产生不同类型的Mφ来分别介导促炎性或抑制炎性反应。T细胞免疫球蛋白粘蛋白-3(T cell immunoglobulin mucin domain-3,Tim-3)是T细胞表面的跨膜蛋白家族的其中一种。Tim-3自2002年发现以来,作为Th1细胞表面标记分子,将Th1和Th2细胞区别开来,与其配体半乳糖凝集素-9(galectin-9,Gal-9)结合后负向调控细胞功能,产生抑制信号导致Th1细胞凋亡和抑制Th1型免疫。目前的研究显示,Tim-3-Gal-9信号通路在免疫逃逸机制具有重要作用。Tim-3表达在Th1和Th17细胞、T调控细胞(Regulatory T cells,Treg)、树突状细胞(dendritic cells,DCs)、单核细胞、肥大细胞和Mφ上,在肿瘤细胞如黑色素瘤、胃癌上亦有表达。目前,Tim-3及其配体Gal-9在肿瘤免疫逃逸机制研究颇多,但是有关Tim-3-Gal-9信号通路在人慢性根尖周病组织Mφ上表达尚未见详细报道。本研究检测不同类型慢性根尖周病组织中Mφ的分布情况,以及Tim-3和Gal-9在Mφ上的表达情况,探讨Mφ及Tim-3和Gal-9在根尖周病发病机制中的作用。研究结果将对后续以MφTim-3-Gal-9为靶点的研究慢性根尖周炎免疫防治提供分子理论基础和实验依据。方法:本研究共收集自愿接受研究72例样本,根据根尖周病类型分为3组:正常对照组22例、慢性根尖周炎组24例以及根尖囊肿组26例。组织标本经过HE染色,光镜下观察各组标本的组织学变化;免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色观察Tim-3、Gal-9和CD14(Mφ标记)阳性细胞在各组标本的表达;免疫荧光双染色法(double-immunofluorescence,DIF),在荧光显微镜下观察双阳性细胞(Tim-3~+-CD14~+和Gal-9~+-CD14~+)在各组根尖周组织上的表达情况。结果:与正常对照组相比,两组慢性根尖周病组Tim-3、Gal-9和CD14阳性细胞密度,Tim-3~+-CD14~+和Gal-9~+-CD14~+细胞密度显著增加(P0.05);慢性根尖周炎组与根尖囊肿组Tim-3、Gal-9和CD14阳性细胞密度,Tim-3~+-CD14~+和Gal-9~+-CD14~+细胞密度无显著差异。结论:慢性根尖周病组织Mφ数目显著增多,Tim-3和Gal-9阳性的Mφ密度与根尖周病的炎症发展趋势相一致,提示Tim-3~+-CD14~+和Gal-9~+-CD14~+细胞可能在慢性根尖周病的发展有着重要作用。
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